目的 探讨流程简化的液质联用技术(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)在大肠埃希菌(Escherichia coli)实现鉴定和鞭毛抗原分型同步联检分析中的应用潜力。方法 基于全基因的蛋白质组学细菌鉴定数据库以及包含大肠埃希菌所有鞭毛抗原蛋白质的数据库,利用流程简化的LC-MS/MS技术对8株标准菌株以及来源于临床分离出的54株大肠埃希菌同时进行鉴定和鞭毛抗原分型分析;同时使用大肠埃希菌3株标准菌株评估流程简化的LC-MS/MS技术在分型鞭毛抗原时样品稀释倍数和获得的鞭毛抗原肽段数量之间的相关性。 结果 流程简化的LC-MS/MS技术对62株大肠埃希菌鉴定和鞭毛抗原分型同步联检分析的准确率均为100%;3株大肠埃希菌标准菌株样品系列稀释倍数和获得的鞭毛抗原肽段数量二者之间具有很好的线性关系,相关系数分别为0.99、0.97、0.98。结论 流程简化的LC-MS/MS技术能够对大肠埃希菌鉴定和鞭毛抗原分型进行准确的同步联合检测分析,该项技术在大肠埃希菌鉴定和鞭毛抗原分型同步联检分析中优势显著,具有良好的应用前景,未来有望成为临床微生物学和公共卫生领域微生物鉴定、分型及微生态研究的重要工具。
目的 分析乐东黎族自治县人民医院收治的2例类丹毒败血症患者的临床及微生物特征,为类丹毒诊断和治疗提供参考依据。方法 回顾性分析乐东黎族自治县人民医院2023年12月—2024年1月收治的2例经血培养确诊为类丹毒败血症患者的临床特征和治疗情况,使用全自动血培养系统和固体培养基培养病原菌,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法和16s rRNA对培养出的细菌鉴定,微量肉汤稀释法检测病原菌对抗菌药物的敏感性。结果 2例患者在冬季发病,均有接触猪或鱼类的外伤感染史,有高热、畏寒、胸闷、气短症状,门诊拟“发热待查”入院。实验室检查结果提示炎症指标异常增高,血和伤口分泌物标本有菌生长。血培养报阳后涂片可见革兰阳性杆菌,呈长丝状或短链排列。将菌株接种于哥伦比亚血琼脂平板,置于35 ℃恒温培养箱中孵育。24 h后观察可见针尖大小的初始菌落形成,继续培养至48 h,菌落逐渐增大并呈现典型的圆形、湿润、透明且凸起形态,边沿整齐,表面呈灰白色,在菌落周围可清晰观察到狭窄的溶血环,菌落涂片革兰染色阴性,分离菌经质谱和16s rDNA测序鉴定为红斑丹毒丝菌;2个分离株对青霉素、氨苄西林、头孢曲松、头孢吡肟、美罗培南、红霉素、克拉霉素和左氧氟沙星均敏感。病例1有恶性肿瘤基础病,就诊时周围组织感染已较严重,使用阿莫西林克拉维酸钾3 d后治疗失败;病例2根据药敏结果接受氨苄西林治疗8 d后取得良好的效果。结论 类丹毒临床特征不典型,易被误诊漏诊,对于从事猪或鱼类相关职业人群,外伤后有高热者,应及时采集相应标本进行病原学检测,根据药敏报告合理使用抗菌药物,改善预后。
目的 探讨甘露糖蛋白(mannoprotein, Mp1p)、半乳甘露聚糖(galactomannan, GM)和1-3-β-D葡聚糖(1-3-β-D glucan, BDG)单独和联合检测对艾滋病合并马尔尼菲篮状菌病(Talaromycosis marneffei, TSM)的诊断价值。 方法 收集291例艾滋病合并马尔尼菲篮状菌住院患者和300例健康体检者外周血标本,检测Mp1p、GM和BDG并分析单独和联合检测诊断TSM的价值,采用ROC曲线分析Mp1p、GM、BDG和联合检测的诊断效能。结果 在单独检测中,Mp1p、GM和BDG检测灵敏度和特异度之间差异有统计学意义(P<0.05),相较于GM和BDG,Mp1p的诊断效能最好,灵敏度和特异度最优。在两两联合检测中,Mp1p与GM组合灵敏度优于GM与BDG组合,差异有统计学意义(P<0.05);Mp1p与GM组合、Mp1p与BDG组合特异度优于GM与BDG组合,差异有统计学意义(P<0.05),Mp1p与GM组合的诊断效能最好。三者联合检测灵敏度优于两两联合检测,差异有统计学意义 (P<0.05),Mp1p与GM组合、Mp1p与BDG组合特异度优于三者联合检测,差异有统计学意义(P<0.05)。Mp1p、GM、BDG检测阳性率分别在CD4+T细胞计数≤100个/μL和>100个/μL患者中差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Mp1p、GM、BDG检测是艾滋病合并TSM早期辅助性诊断指标,其中Mp1p诊断效能优于GM和BDG,联合检测可提高诊断效能。
目的 建立一种快速、灵敏和高效的溪蟹体内卫氏并殖吸虫囊蚴环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)检测方法,为并殖吸虫的现场快速检测提供有力工具。方法 2022年9月至2023年12月,在卫氏并殖吸虫流行区安徽省休宁县采集溪蟹,以卫氏并殖吸虫核糖体DNA第二内部转录间隔区(second internal transcribed spacer, ITS2)基因序列为靶序列设计LAMP特异性引物,并选择一种新型显色剂羟基萘酚蓝(hydroxynaphthol blue solution, HNB)与传统显色剂钙黄绿素比较,建立溪蟹卫氏并殖吸虫囊蚴LAMP检测方法;同时与PCR法比较,评价该方法的特异度、灵敏度和现场应用效果。结果 建立LAMP反应体系可特异性扩增卫氏并殖吸虫囊蚴和成虫DNA,最低可测出1个卫氏并殖吸虫囊蚴,与日本血吸虫、弓形虫、华支睾吸虫、十二指肠钩虫及美洲钩虫无交叉反应。HNB显色剂法与其LAMP实时浊度仪法的最低核酸浓度检出限为1.92×10-13 g,而钙黄绿素显色剂法及其LAMP实时浊度仪法以及PCR法为1.92×10-12 g。采用沉淀镜检法、LAMP法(HNB、钙黄绿素)和PCR法同时检测现场捕获的40只溪蟹,沉淀镜检法检出阳性率为22.5%(9/40),LAMP法和PCR法检出阳性率均为27.5%(11/40)。其中,有2份镜检阴性样品采用LAMP法和PCR法检测均为阳性,3种方法检测结果差异无统计学意义(χ2 =0.348,P>0.05)。HNB与钙黄绿素的一致性检验Kappa值为1。结论 本研究成功建立一种溪蟹卫氏并殖吸虫LAMP检测方法,为流行区淡水蟹并殖吸虫病监测工作提供了简易高效的分子学检测手段。
目的 了解河南省老年肺结核患者诊断延迟现状,分析肺结核诊断时间和检出率的影响因素,为制订结核病防治措施提供依据。方法 通过“中国疾病预防控制信息系统”子系统“结核病信息管理系统”,收集2016—2023年河南省非结防机构报告的65岁以上老年肺结核疑似和临床诊断病例的信息。采用回顾性分析流行病学方法对研究对象进行人口学资料及就诊数据整理,计算肺结核诊断时间、检出率和诊断延迟率。采用单因素log-rank检验及多因素Cox比例风险回归模型分析肺结核诊断时间和检出率的影响因素。结果 河南省2016—2023年105 458例老年疑似和临床诊断病例中,24 846例最终诊断为肺结核患者,肺结核检出率为23.56%;诊断时间为68(27,184) d,14 d和28 d诊断延迟率分别为53.57%和35.34%。Cox回归分析结果显示,“订正卡”(HR=0.059,95.0%CI:0.057~0.062,M=75 d)、“疑似病例”(HR=0.218,95.0%CI:0.212~0.225,M=113 d)和“首诊单位为基层医疗机构”(HR=0.605,95.0%CI:0.572~0.639,M=158 d)是老年肺结核诊断时间和检出率的前3位独立影响因素。结论 河南省老年肺结核患者诊断延迟严重,需要探索针对老年人更加便捷高效的诊断和转诊流程,提高首诊机构诊断能力,加强对公众的健康教育,同时依托基本公共卫生服务项目开展主动筛查,做到早诊断、早治疗,减少诊断延迟,控制结核病的传播。
目的 评估靶向高通量测序(targeted next-generation sequencing, tNGS)在鉴别诊断结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tuberculosis complex, MTBC)及非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria, NTM)感染中的应用价值。方法 收集广州市胸科医院2023年8月—2025年1月收治的466例疑诊分枝杆菌病的住院患者,采集痰液、支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF)及其他类型样本共506份,分别采用tNGS法与传统诊断方法(涂片、分枝杆菌培养及菌种鉴定、分子生物学检测)鉴别诊断MTBC和NTM,评估tNGS法的检测效能。结果 tNGS法对MTBC的检出率为30.27%,稍高于培养鉴定/分子生物学的26.99%,但差异无统计学意义(χ2=1.28,P>0.05);tNGS法对NTM的检出率为28.83%。痰液、BALF及其他样本中tNGS法对MTBC检出率分别为37.50%、28.07%及36.84%,均高于培养鉴定/分子生物学的35.42%、25.13%及21.05%,差异无统计学意义(χ2=0.09,0.83,1.15,P>0.05)。对纳入的148例tNGS法检测为MTBC阳性患者中,分枝杆菌培养鉴定为MTBC的占47.97%,鉴定为NTM的占4.06%,分枝杆菌培养阴性的占47.97%,分枝杆菌培养鉴定为 MTBC 的 tNGS 序列数显著高于阴性组(Z=-3.05,P<0.05);涂片及分子生物学阳性组的 tNGS 序列数亦显著高于对应阴性组(Z=-4.99,-3.19,P<0.05)。以培养鉴定/分子生物学为参照标准,tNGS法检测 MTBC的灵敏度、特异度及Kappa分别为84.85%、89.92%和0.72。结论 tNGS技术对MTBC检测具有高灵敏度和快速的优点,可为结核病早期鉴别诊断提供有效支持。
目的 研究引起食源性暴发事件的沙门菌的流行病学特征及病原学特征,为防控食源性疾病提供科学依据。方法 收集2019—2023年长沙地区食源性暴发事件监测数据和66株沙门菌,用玻片凝集试验确定血清型,微量肉汤稀释法检测17种抗菌药物的敏感性,脉冲场凝胶电泳(pulsed-field gel electrophoresis, PFGE)检测分子分型,用全基因组测序技术分析多位点序列型别(multi-locus sequence typing, MLST)、耐药基因、核心基因组多位点序列型别(core genome multi-locus sequence typing, cgMLST)并生成进化树分析其相关性。结果 2019—2023年长沙地区共发生由沙门菌引起的食源性疾病暴发事件13起,暴发的主要场所是餐饮环节(69.23%),包括中央厨房、大型酒店和中小型餐馆。焙烤食品、蛋制品是事件的主要原因食品,分别占总事件数的63.64%和20.32%。66株沙门菌可分为4个血清型,肠炎沙门菌为优势血清型,序列分型(sequence typing, ST)以ST11为主。在抗菌药物敏感性测试中,实验菌株对链霉素(100.00%)、萘啶酸(69.70%)、氨苄西林(54.55%)的耐药率较高。利用resFinder数据库共预测到4大类6种耐药基因,耐药表型与耐药基因大致相符。同一起事件分离自食品和患者的菌株PFGE型别相似度100%。cgMLST进化树中同一起事件分离株单独从簇,提示基因组有差异,不同源。结论 ST11型肠炎沙门菌为引起本市食源性疾病暴发事件的常见病原体,对多种抗菌药物耐药且携带多种耐药基因,应加强中央厨房和餐饮服务业的监管,尤其是焙烤食品和蛋制品。
蚊传疾病是由病原传播媒介雌蚊传播的自然疫源性疾病,常见的有流行性乙型脑炎、疟疾、登革热和黄热病等危害性较大的传染病,是全球重要的公共卫生问题。随着气候变化与国际交流的发展,近年来国内输入型蚊传疾病时有暴发,亟需适用于现场的快速检测技术,从而将疫情遏制在早期阶段。新兴的分子即时检测(Point-of-care testing,POCT)技术在采样现场利用便携式分析仪器及配套试剂即可快速得到检测结果,能够快速、高效、准确诊断病原体,目前在食品安全、口岸检疫、法医检验等多个领域已有应用,在预警蚊传疾病疫情方面有较大应用潜力。近年来POCT技术在蚊传疾病中已有较为广泛的研究,本文就POCT技术的基本概念、在蚊传疾病中的研究进展作一综述,为领域同行推进蚊传疾病的检测提供参考。
基孔肯雅热在全球热带和亚热带地区广泛流行,近20年在印度洋地区、南亚和东南亚地区流行日趋严重,并导致我国至少16个省(直辖市、自治区)发生输入性病例,其中广东、浙江和云南省还发生本地流行。云南省不明原因发热患者和蚊虫、浙江省蚊虫及广西壮族自治区蠓虫中还检测到基孔肯雅病毒基因序列。我国基孔肯雅病毒流行株主要为东/中/南非基因型印度洋进化谱系和亚洲基因型。白纹伊蚊广泛分布在我国中部、东部和南部地区,埃及伊蚊分布在海南、广东、云南和台湾的部分地区,这二种伊蚊对基孔肯雅病毒具有较高的易感性和传播性。我国白纹伊蚊和埃及伊蚊分布地区仍存在本病暴发或大流行的风险,输入性病例的监测和管理以及媒介伊蚊控制是当前亟待加强的防控工作。本文对我国基孔肯雅热流行病学和病原生物学研究情况进行综述,为防控本病提供参考。
目的 探究白纹伊蚊唾液蛋白(mosquito salivary protein, MSP)诱导的免疫应答对Ⅰ型干扰素受体缺陷 (IfnaR-/-)鼠中2型登革病毒(dengue virus, DENV-2)感染的影响。方法 使用白纹伊蚊(广州株)雌蚊叮咬IfnaR-/-鼠,每周1次,连续4周进行主动免疫,并观察其饱血情况,末次叮咬后3周获取免疫血清。Western blot检测鼠血清中抗MSP抗体。间接ELISA法检测抗MSP IgG的效价及其亚类。使用Nanoject Ⅱ自动纳升注射器(Drummond)将107 TCID50/mL的DENV2显微注射入蚊胸部,采用实时荧光定量逆转录PCR(real-time quantitative reverse transcription PCR, qRT-PCR)检测不同时间点蚊唾液腺中DENV-E基因水平。使用DENV-2感染的雌蚊叮咬小鼠,qRT-PCR检测免疫/未免疫组蚊体内病毒残留量。蚊叮咬感染5 d后,qRT-PCR检测免疫/未免疫鼠不同组织中DENV-E基因的核酸变化;病毒空斑实验测定鼠脑组织中活病毒含量。结果 Western blot显示鼠血清中含有针对多种MSP的特异性IgG。抗MSP IgG效价可达1∶800,以IgG1为主,且可维持21 d。胸腔注射10 d后蚊唾液腺中DENV-E基因含量达复制平台期。叮咬完成后qRT-PCR结果显示蚊唾液腺中的余留病毒量,推测2组小鼠初始感染量相近。免疫组鼠的脾脏,肝脏,脑组织中的病毒核酸含量明显低于未免疫组(P<0.001),且脑组织中活病毒量低(P<0.001)。结论 蚊唾液蛋白诱发的适应性免疫具有抑制DENV-2感染的效应,为探究白纹伊蚊唾液蛋白具有抗病毒的免疫原组分提供实验基础。
目的 调查云南三市县鼠形动物携带钩端螺旋体状况及检测犬血清钩端螺旋体抗体阳性情况。 方法 2019年7—8月,在云南省梁河县、芒市和弥勒市选取自然村进行野外捕鼠,经鼠形动物形态学鉴定后采集肾脏组织并提取DNA;采用常规PCR扩增钩端螺旋体SecY目的基因片段,对检出样本进行测序,所得序列做同源性比对和构建系统发育树。并在调查区采集犬股动脉血,收集其血清,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测犬血清钩端螺旋体IgG抗体;应用卡方检验分析不同影响因素下犬血清钩端螺旋体抗体情况。结果 捕获鼠形动物490 只,经常规PCR检出钩端螺旋体携带,携带率为0.41%(2/490),其中分别在梁河县1只黄胸鼠和1只斯氏家鼠经常规PCR检出钩端螺旋体携带,芒市和弥勒市未检出。同源进化分析显示2份钩端螺旋体菌株均为致病性博氏钩端螺旋体(Leptospira borgpetersenii)。采集犬血清305份,16份犬血清钩端螺旋体IgG抗体阳性,阳性率为5.25%。结论 云南省三市县鼠形动物和犬血清均有钩端螺旋体感染,对人类有一定的致病风险,需进一步加强监测并采取预防控制措施。
目的 发现HIV/HCV合并感染者中HCV自发清除特点,找出HCV自发清除的影响因素及HCV自发清除者与HCV-RNA阳性患者之间的差异,为HIV/HCV合并感染者HCV-RNA筛查及治疗提供临床指导。 方法 以2022年1月—2024年5月云南省传染病医院符合纳入标准的HIV/HCV合并感染者作为研究对象,其中未治疗的HCV-RNA阴性者作为实验组(清除组)、未治疗的HCV-RNA阳性者作为对照组(阳性组),收集2组患者的人口统计学、临床特征、治疗和实验室检测指标,计算HCV自发清除的能力,采用logistic回归分析探讨HIV与HCV合并感染后HCV自发清除的影响因素,并比较清除组和阳性组实验室指标及其肝功能损伤情况。 结果 共收集到148例HIV/HCV合并感染者,其中清除组70例、阳性组78例(剔除资料不全者3例),HCV自发清除率为9.1%(70/773)。单因素分析结果表明年龄、抗反转录病毒治疗(antiretroviral therapy, ART)方案、抗病毒治疗时间≥16年均有统计学意义(P<0.05)。多因素回归分析表明使用含蛋白酶抑制剂方案(OR=0.228, 95%CI:0.064~0.810)是阻碍HCV自发清除的影响因素,抗病毒治疗时间≥16年(OR=8.587, 95%CI:1.854~39.775)是促进HCV自发清除的影响因素。比较阳性组和清除组实验室指标发现阳性组ALT、AST、天冬氨酸氨基转移酶与血小板比率指数(aspartate aminotransferase to platelet ratio index, APRI)评分、纤维化指数(fibrosis 4 score, FIB-4指数)平均值及异常率均高于HCV自发清除组(P<0.001)。 结论 HCV合并感染HIV患者的HCV自发清除率降低,使用含蛋白酶抑制剂的ART方案、抗病毒治疗时间≥16年是HCV自发清除的独立影响因素,HCV自发清除者较HCV阳性者的肝功能损伤程度更轻。
目的 分析武汉市2014—2023年肺结核疫情流行特征,为制订和完善结核病防治规划策略提供科学依据。方法 对中国疾病预防控制信息系统2014—2023年武汉市登记管理的肺结核病案信息数据进行描述性统计分析,分析肺结核患者三间分布特征。结果 2014—2023年武汉市累计登记活动性肺结核患者58 131例,年均登记发病率为49.06/10万,年递降率仅为4.70%;而菌阳肺结核所占比例则逐年上升,年递增率为4.66%。男女登记发病数比为 2.12∶1,登记发病率男性显著高于女性;患者年龄以50~<70岁段(36.85%)和20~<40岁段(31.75%)发病数占比最高,而登记发病率以17~29岁和60~85岁年龄段为2个高峰;每年登记发病高峰是4—6月,低谷是12月—次年2月,呈现一定的季节性;患者职业以家政、家务及待业人员、农民、离退休人员、商业服务人员和学生为主,分别占患者总数的35.56%、15.10%、14.83%、6.07%和5.85%;地区肺结核登记发病率方面远城区高于近城区,排名前5位是蔡甸区 (71.52/10万)、黄陂区(59.43/10万)、新洲区(58.63/10万)、硚口区(55.56/10万)和江夏区(55.23/10万),共登记15 318例,占全市患者总数的26.35%;局部空间自相关分析结果显示,武汉市肺结核高发热点区域主要分布在百步亭社区、二七社区、易家墩社区、六角亭社区、和平街社区、厂前街社区、新沟镇、玉贤镇、奓山镇、侏儒镇、金口镇、五里界镇、武湖街道、盘龙经济开发区以及凤凰镇、道观河街道等地。结论 武汉市近10年肺结核疫情下降速度未达预期,经济较落后区域和生活收入低的弱势人群发病率相对较高,卫生部门应因地制宜改进防控策略,创新技术和手段加强对重点区域和高危人群进行结核病主动筛查和潜伏感染预防干预。
目的 探究阿奇霉素对埃及伊蚊和白纹伊蚊化蛹周期的影响,分析相关代谢通路变化及关键基因表达差异,初步探索阿奇霉素对2种伊蚊化蛹周期的调控机制。方法 构建多个浓度梯度阿奇霉素溶液处理2种伊蚊,定时观察并记录幼虫化蛹时间、化蛹率等生长发育指标,采用生存分析和卡方检验等统计方法分析其化蛹差异,并对处理组和对照组差异样本进行转录组测序分析,结合RT-qPCR验证与2种伊蚊化蛹周期相关的通路及关键基因表达。 结果 19.600 μg/L阿奇霉素暴露可显著缩短2种伊蚊的化蛹时间(P<0.01),而0.196 μg/L、1.960 μg/L阿奇霉素对2种伊蚊的化蛹时间无明显影响(P>0.05)。经19.600 μg/L阿奇霉素处理后,埃及伊蚊中识别出695个差异表达基因,GO富集识别出32个功能类别,KEGG富集结果显示内质网蛋白质加工等信号通路发生改变;白纹伊蚊中识别出984个差异表达基因,GO富集识别出35个类别,KEGG富集结果显示氧化磷酸化等信号通路发生改变。RT-qPCR验证结果显示,埃及伊蚊内质网中的蛋白质加工通路中的AAEL013350、AAEL020291、AAEL023117和AAEL027089基因在蛹中表达上调,AAEL023595基因下调;白纹伊蚊氧化磷酸化通路中的gene-LOC109404801、gene-LOC109428450、gene-LOC115257348基因在蛹中表达上调。结论 本研究证实19.600 μg/L阿奇霉素可以显著缩短埃及伊蚊和白纹伊蚊的化蛹周期,其作用机制可能分别通过显著促进内质网蛋白质加工通路和氧化磷酸化通路等代谢途径及相关基因的表达实现。
目的 了解南昌市蚊虫密度、分布、种群构成及季节消长趋势,为指导蚊类及蚊媒传染病的防控提供科学依据。方法 2018—2023年采用诱蚊灯法在南昌市居民区、公园、医院、农户和牲畜棚等生境开展蚊媒监测,3—11月每月监测2次,上下旬各1次,并对监测结果进行汇总分析。以完全随机设计秩和检验(Krusal-Wallis H)比较不同年度、不同月份和不同生境间蚊密度的差异,不同年度蚊虫构成比差异采用χ2检验。 结果 共捕获成蚊269 587只,总平均蚊密度为46.34只/(灯·夜),蚊密度消长整体呈单峰走势,最高峰为6月。不同年度间平均蚊密度呈下降趋势,但差异无统计学意义(H=1.890,df=5,P=0.864);不同月份间蚊密度差异有统计学意义(H=47.448,df=8,P<0.001);不同生境间蚊密度差异有统计学意义(H=87.876,df=4,P<0.001)。致倦库蚊是居民区、公园和医院的优势蚊种,三带喙库蚊是农户和牲畜棚的优势蚊种。每年的6—9月为成蚊密度高峰期,10月出现大幅下降。牲畜棚蚊虫密度470.15只/(灯·夜)高于其他生境。6年间,致倦库蚊和白纹伊蚊占比逐年增加,中华按蚊占比先升后降(2021年占比最高),三带喙库蚊占比逐年减少,骚扰阿蚊占比低位波动。结论 南昌市蚊虫密度呈下降态势,致倦库蚊和三带喙库蚊为本地优势蚊种,6—9月为蚊密度高峰期,牲畜棚和农户为蚊类侵害高发场所,应加强重要蚊媒重点区域的生态学监测,同时依据监测结果及时采取有效控制措施,防止蚊媒传染病的暴发流行。
目的 探讨艾滋病患者结核病相关免疫重建炎症综合征(tuberculosis associated immune reconstitution inflammatory syndrome, TB-IRIS)的临床特征与发生的危险因素,以提高对该病的诊治水平。方法 回顾性纳入2020年6月—2024年2月广州一家艾滋病定点医院收治的艾滋病合并结核病患者,根据抗病毒治疗(antiretroviral therapy, ART)后是否发生IRIS分成TB-IRIS组和非IRIS组(Non-IRIS)。收集患者入院基线和IRIS点的临床资料、ART方案,分析 TB-IRIS临床特征及基线危险因素。结果 共入组222例艾滋病合并结核病患者,其中 58例(26.1%)发生IRIS,IRIS发生中位时间17(11, 29) d,主要症状包括:再次发热(89.7%)、呼吸道症状加重(43.1%)及浅表淋巴结肿大(19.0%)。 TB-IRIS组较Non-IRIS组入院基线肿瘤坏死因子-α和干扰素-γ更高(1.4 pg/mL vs 0.8 pg/mL,P=0.024;8.1 pg/mL vs 2.9 pg/mL,P=0.008)。2组ART方案差异无统计学意义(P>0.05),但TB-IRIS组抗结核治疗(anti tuberculosis therapy, ATT)至启动ART的间隔短于Non-IRIS组(10 d vs 14 d,P=0.014),60.4%于ART后2~3周发生IRIS。发生IRIS时,TB-IRIS组CD4+T淋巴细胞计数高于Non-IRIS组(143 个/μL vs 94 个/μL,P=0.021);且CD4+T淋巴细胞计数及 CD4+/CD8+比值与入院基线相比的增值,均高于Non-IRIS组(91 个/μL vs 37个/μL, P<0.001;0.14 vs 0.07, P=0.006)。多因素分析显示:入院基线CD4+T淋巴细胞计数低于50个/μL,及ATT到启动ART间隔短于10 d,可能与IRIS相关 (OR=4.02,P=0.029;OR=2.06,P=0.044)。结论 艾滋病合并结核病患者ART后2~3周再次出现结核病症状或加重及免疫功能快速重建时,需警惕IRIS可能。HIV阳性患者应避免进展到极晚期才开始ART,合并结核病患者抗结核治疗 10 d后再启动ART,这些措施有助于降低IRIS发生率。
目的 探讨1,25二羟基维生素D3(1,25(OH)2D3)是否通过抑制cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路使双链 DNA ( double strands DNA, dsDNA) 诱导的小鼠外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMCs)中的炎症因 子IFN-α、IFN-β分泌减少,探寻1,25(OH)2D3治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosue, SLE)的新靶点。 方法 取10只8周龄雌性C57BL/6小鼠,10%水合氯醛麻醉小鼠,腹主动脉取血,分离PBMCs,将其分为2组,第1组为dsDNA(0、20 、40、80 μg/L) 诱导组,其中0 μg/L的为对照组,筛选dsDNA最佳作用剂量。第2组PBMCs首先使用诱导dsDNA(40 μg/L)处理,然后再用1,25(OH)2D3(10-8、10-7、10-6 μmol/L)进行治疗,其中空白组为未经1,25(OH)2D3处理的0 μg/L dsDNA的小鼠PBMCs,对照组为未经1,25(OH)2D3处理的40 μg/L dsDNA的小鼠PBMCs。48 h后,采用CCK8检测各组PBMCs的细胞活力,ELISA法检测各组PBMCs中IFN-α和IFN-β的分泌水平,Western blot检测各组小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的蛋白表达水平,观察1,25(OH)2D3对cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号的蛋白表达及IFN-α、IFN-β分泌的影响。结果 dsDNA剂量依赖性地使PBMCs的细胞活力显著下降(P<0.01),在40 μg/L的dsDNA时,细胞活力差异较显著性,且dsDNA剂量依赖性地促进炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),小鼠PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3的表达水平较对照组上调(P<0.05)。在1,25(OH)2D3治疗dsDNA诱导PBMCs 的细胞组中,1,25(OH)2D3剂量依赖性地使dsDNA处理的PBMCs 细胞活力显著提升(P<0.01),降低了炎症因子IFN-α和IFN-β的分泌(P<0.01),在加入1,25(OH)2D3治疗的dsDNA处理的PBMCs中cGAS、pTBK1、pSTING、pIRF3、IFN-Ⅰ的表达水平较对照组下调(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可负反馈调节dsDNA激活PBMCs中的cGAS/STING/IFN-Ⅰ信号通路且降低炎症因子的IFN-α和IFN-β的分泌。
目的 探讨初治肺结核合并2型糖尿病患者(pulmonary tuberculosis combined with type 2 diabetes mellitus, PTB-T2DM)抗结核治疗过程中出现肝损伤及预后不良的影响因素,以期为降低肝损伤发生率和改善预后提供参考。方法 采用回顾性队列研究,连续性纳入2018年11月至2023年11月广元市精神卫生中心收治的符合入组标准的170例在抗结核治疗过程中出现肝损伤的PTB-T2DM患者作为肝损伤组,并根据性别、年龄按1∶2匹配同期完成抗结核治疗且未出现肝损伤的340例PTB-T2DM患者作为对照组。回顾性收集受试者病历资料及相关生化指标,采用多因素Cox比例风险回归模型分析影响肝损伤发生的高危因素。随访8个月后,依据患者预后情况将肝损伤组分成2个亚组,分析患者出现肝损伤后预后不良情况及其影响因素。结果 与对照组相比,肝损伤组患者空腹血糖水平明显升高,而白蛋白与球蛋白比值、血红蛋白水平显著下降(P<0.05);在调整了混杂因素后,受教育程度、饮酒史、白蛋白与球蛋白比值、糖尿病病程、抗结核治疗药物是初治PTB-T2DM患者抗结核治疗过程中发生肝损伤风险的独立影响因素。预后不良发生率为14.12%,多因素Cox比例风险回归分析显示,肝损伤时血糖控制不良、诊断延迟、就诊延迟、未规律服药、出现发生肝损伤时间≥8周、从出现消化道症状和(或)出现肾功能损伤到停结核药物的间隔时间较长均是引发初治PTB-T2DM患者出现肝损伤后预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 初治PTB-T2DM患者抗结核治疗过程中预后不良发生率均较高,且受多重影响因素。尤其血糖控制不良、诊断延迟、出现发生肝损伤时间≥8周、从出现消化道症状到停结核药物的间隔时间较长者,发生肝损伤及不良预后的风险更高。
目的 分析贵州省2013—2022年65岁及以上(简称老年)肺结核患者的登记情况,为制定老年人群结核病防控策略提供科学依据。方法 收集“中国疾病预防控制信息系统”子系统“结核病管理信息系统”中登记日期为2013—2022年肺结核患者病例信息,包括性别、年龄、民族、职业分类、发现方式、病原学诊断情况等,分析年龄≥65岁老年人肺结核患者发现、登记和治疗等数据,并与其他年龄组进行比较。登记率的时间变化趋势使用χ2趋势检验,组间比较使用χ2检验。结果 贵州省2013—2022年共登记老年肺结核患者 73 462例,占同期登记总病例数的19.26%,老年患者年均登记率高于非老年患者,2组差异有统计学意义(χ2=34 874.00,P<0.001);老年患者肺结核登记率以年均1.5%的速率下降,低于非老年患者年均4.7%的下降速率,2组差异有统计学意义(χ2趋势=2 409.80,P<0.001);老年患者男女比例约为1.50∶1,非老年患者男女比例约为1.98∶1,老年男性患者年均登记率高于老年女性患者(χ2=4 716.80,P<0.001)、非老年男性患者(χ2=16 470.00,P<0.001)和非老年女性患者(χ2=11 277.00,P<0.001),差异均有统计学意义。老年汉族患者构成比高于少数民族,老年汉族以年均6.2%的速率上升 (χ2趋势=1 168.45,P<0.001),高于老年少数民族4.5%的上升速率(χ2趋势=293.55,P<0.001);老年患者主要以固定职业或离退休、农民为主 ;老年患者数主要集中在遵义市、毕节市和铜仁市;老年患者复治占比高于非老年患者;老年患者病原学阳性占比为47.18%,高于非老年患者;老年患者的主要发现方式是转诊(42.34%),占比最低的发现方式是主动筛查(0.10%);老年患者就诊延迟率高于非老年患者;老年患者发现延误率高于非老年患者;老年患者治疗成功率为84.88%,低于非老年患者92.24%。结论 贵州省老年人群肺结核疫情防控形势严峻,建议通过提升老年人群肺结核主动筛查率和提升确诊患者治疗成功率,以有效控制老年肺结核疫情。
目的 探讨二氧化碳诱蚊灯法在城市居民区环境中对蚊虫密度控制水平监测的效能,为蚊虫密度监测方法提供科学依据。方法 收集在北京市东城区2017—2019年的7—9月采用人诱停落法和二氧化碳诱蚊灯法对居民区白纹伊蚊密度监测数据,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)探讨二氧化碳诱蚊灯法在不同蚊虫密度控制水平下的预测效能并确定相应水平的截断值。结果 利用人诱停落法26次监测中16次未达标,二氧化碳诱蚊灯法监测绝对蚊虫密度最高可达30.00只·(灯·h)-1,东城区居民区环境中,白纹伊蚊的活动高峰主要出现在8月份,受异常气候的变化2017年蚊虫高峰向后延迟至9月中旬;二氧化碳诱蚊灯法在蚊虫密度控制水平为A级(停落指数≤0.5)、B级(停落指数≤1.0)和C级(停落指数≤1.5)时的ROC曲线下面积(area under curve, AUC)分别为0.919[灵敏度为76.2%,特异度为100.0%,截断值为2.50只·(灯·h)-1,P<0.01]、0.865[灵敏度为72.2%,特异度为87.5%,截断值为3.00只·(灯·h)-1,P<0.01]和0.859[灵敏度为75.0%,特异度为90.0%,截断值为3.13只·(灯·h)-1,P<0.01],在A级控制水平时预测效能优于B级和C级。结论 二氧化碳诱蚊灯法在城区居民区环境中,对蚊虫不同控制水平的预测效能较好,其量化评价标准,可为实际蚊虫防控工作和蚊媒传染病的监测预警提供技术指导和决策支持。
目的 分析青海地区1株GⅠ型诺如病毒全基因组序列,了解其基因结构特点及进化特征,积累该省GⅠ型诺如病毒感染的分子流行病学基础资料。方法 以青海省妇女儿童医院为监测哨点,2023年按《全国病毒性腹泻监测方案》(2021版)要求开展5岁以下腹泻住院患儿病毒性腹泻监测,采用荧光定量PCR方法检测病例样本,筛选Ct值≤30的1株GⅠ型诺如病毒(QH2023/23-24)开展全基因组测序,对测序结果进行系统发育树分析、同源性分析和氨基酸变异位点分析。结果 2023年GⅠ型诺如病毒阳性率为3.33%(6/180),系统进化分析表明QH2023/23-24株GⅠ型诺如病毒为 GⅠ.3[P13]型。该株病毒VP1区与RdRp区皆与泰国2023年分离株PP584624.1亲缘关系最近。衣壳VP1 区氨基酸序列与泰国2023年分离株PP584624.1相比有M2V 1个位点改变,与中国浙江2019年分离株PQ632217.1相比有M2V、T27A和I237L 3个位点改变。结论 首次利用全基因测序方法鉴定青海省GⅠ型诺如病毒基因型,通过序列分析显示该株病毒(QH2023/23-24)为GⅠ.3[P13]型,为我国流行的优势毒株。该研究为我国诺如病毒分子进化特征研究提供了序列参考,今后应加强本地区诺如病毒监测,为疫情防控提供理论依据。
目的 对2024年9月深圳市宝安区某建筑工地1起登革热疫情进行调查分析,探讨新型蚊媒监测技术与抗药性检测的应用成效。方法 对2024年9月深圳市宝安区1起登革热疫情进行流行病学调查收集病例数据,运用新型蚊媒监测技术MS-300与传统布雷图指数(breteau index, BI)法对比监测蚊虫密度,同时检测白纹伊蚊电压门控钠离子通道(voltage-gated sodium channel, VGSC)基因1534位点突变情况。结果 本起登革热疫情共持续40 d,共报告病例126例,罹患率为6.94%,主要病原体为登革病毒Ⅱ型(DENV-2)。施工地核心区的蚊媒监测结果显示,自9月8日起BI(18.00)和MS-300捕获成蚊数量(3只/d)呈现下降趋势。基于MS-300的24 h动态监测数据发现疫点蚊虫活动呈现双高峰特征,集中于7:30—8:00和16:00—19:00时段。疫点采集的白纹伊蚊幼虫VGSC基因1534位点检测到TGC(F1534C)和TCC(F1534S) 2种突变,提示该种群对拟除虫菊酯杀虫剂产生抗性。结论 新型蚊媒监测技术MS-300在建筑工地这一区域的初步应用,实现了对蚊媒活动在线实时、动态监测,结合蚊虫抗药性检测,为优化基层登革热防控策略提供科学依据,构建更为有效的登革热防控机制。