目的 对青海省玉树州喜马拉雅旱獭鼠疫疫源地分离的鼠疫噬菌体117、Y280、Y272进行生物学特性分析,为该鼠疫疫源地鼠疫的防治及防控提供参考依据。方法 以鼠疫疫苗株EV76作为宿主菌,采用双层平板法分离技术,从青海省玉树州鼠疫疫源地167份喜马拉雅旱獭结肠样本中分离出具有代表性的3株鼠疫噬菌体,经纯化处理后进行增殖。通过电镜观察形态,对pH稳定性、热稳定性、紫外线敏感性、裂解谱、一步生长曲线等生物学特性进行检测,利用全基因组测序分析3株噬菌体。结果 鼠疫噬菌体形态学鉴定显示,3株噬菌体均为肌尾噬菌体,可在LB平板上形成0.5~2.5 mm的透亮噬菌斑。生物学特性分析表明,分离的噬菌体均对3株大肠埃希菌具有裂解活性,在60 ℃和pH 5~10范围内比较稳定。紫外线照射30 min内完全失活。全基因组分析结果显示,噬菌体117的基因组总长度为30.68 kb,GC含量为52.9%。Y272的基因组总长度为29.49 kb,GC含量为51.77%。Y280的基因组总长度为28.80 kb,GC含量为51.98%。结论 本研究分离纯化得到3株鼠疫噬菌体,均表现出优异的裂解活性与环境稳定性。在一定程度上间接反映该疫源地生态环境稳定,可为该区域鼠疫流行病学静息期相关基础研究提供参考依据。
目的 了解云南省齐氏姬鼠-大绒鼠疫源地常见小型兽类巴尔通体感染状况及其基因特征,为云南省巴尔通体的防控提供依据。方法 于2025年在云南省玉龙县、丽江市古城区、剑川县、鹤庆县采用笼夜法捕获小型兽类,经形态学鉴定后解剖,取其肺、肝、脾等脏器提取DNA,采用普通PCR方法扩增巴尔通体gltA基因片段,对扩增产物阳性样本进行测序,并与GenBank中核苷酸序列进行比对,使用MEGA12.0软件,采用邻接法构建系统进化树,进行系统进化分析。结果 共捕获常见小型兽类1 731只,隶属于3目4科15种,捕获的小型兽类中齐氏姬鼠捕获1 344只(77.64%),是当地的优势种;其次是大绒鼠282只(16.29%)。麝鼩、四川短尾鼩及赤腹松鼠等数量较少。普通PCR检测脏器样本1 731份,巴尔通体阳性118份,总感染率为6.82%。玉龙、古城、鹤庆、剑川感染率分别为4.50%、12.28%、11.05%、2.91%,不同地区小型兽类巴尔通体感染率差异有统计学意义(χ2=38.097,P<0.05)。不同种类小型兽类巴尔通体感染率差异有统计学意义(Fisher确切概率法,P<0.05)。序列比对结果表明,所检出的巴尔通体主要包括两种基因型,分别为Bartonella grahamii以及一种未确定具体种类的巴尔通体。结论 云南省齐氏姬鼠-大绒鼠鼠疫疫源地常见小型兽类存在巴尔通体感染,虽感染率较低,基因型单一,但对人群有致病风险,应加强当地防控监测。
目的 了解云南省野鼠鼠疫自然疫源地鼠巢蚤群落结构及季节性动态情况,为制定鼠疫防控措施提供参考依据。方法 2023—2024年在云南省剑川县和玉龙县历史疫点核心区,选择农耕地生境的地埂,采用挖掘鼠巢的方法,每月开展1次鼠巢蚤监测。将采集的鼠巢及其内容物带回实验室,在瓷盆中检蚤,依据《云南蚤类志》在光学显微镜下进行形态学鉴定与分类计数。计算鼠巢染蚤率、蚤指数、多样性指数、均匀度指数、优势度指数等指标,并采用集中度法和圆形分布法分析鼠巢蚤数量的季节集中趋势和高峰期。结果 共挖掘鼠巢655个,其中染蚤鼠巢95个,染蚤率为14.50%;共检获鼠巢蚤708匹,平均蚤指数为1.08。蚤类隶属于3科6属11种,优势种为高山狭臀蚤(33.47%)、方叶栉眼蚤(33.47%)和特新蚤指名亚种(15.54%)。染蚤率与蚤指数均在1月份达到峰值,分别为32.69%和3.54;8月份未检获蚤类。雌性蚤占比为65.82%,明显高于雄性。集中度法分析显示,M值为0.39,表明鼠巢蚤数量分布存在一定的季节性聚集。圆形分布法分析结果显示,平均角
目的 在云南省野鼠鼠疫疫源地筛选适用于监测和诱捕宿主动物的高效、适配诱饵,为该区域鼠疫监测技术优化提供科学依据。方法 2023年4月—2024年3月,使用自制油条、苹果和火腿肠作为监测诱饵,在云南省玉龙纳西族自治县和剑川县设置监测样点,采用笼夜法开展野外诱捕试验,分析3种诱饵的捕获效果。结果 此次试验总捕获率为22.57%(1 687/7 473),3种诱饵均对宿主动物有较好的捕获效果,自制油条、苹果和火腿肠捕获率分别为28.45%(709/2 492)、19.64%(491/2 501)和19.63%(487/2 480),不同诱饵捕获率差异有统计学意义(χ2=73.964,P<0.001)。从月份上看,自制油条月度捕获量为(29.54±11.21)只,捕获效果和稳定性最好;苹果和火腿肠月度捕获量分别(20.45±23.00)只和(20.29±18.50)只,捕获效果相似,但苹果捕获稳定性相对较低。在物种捕获上,姬鼠属对不同诱饵的偏好顺序为自制油条>火腿肠>苹果(χ2=171.506,P<0.001);绒鼠属对不同诱饵的偏好顺序为苹果>自制油条>火腿肠(χ2=124.435,P<0.001),家鼠属对不同诱饵的偏好顺序是自制油条>火腿肠和苹果(χ2=15.652,P<0.001);其他鼠种(如白腹鼠属、松鼠、树鼩等)对不同诱饵的偏好顺序为苹果>自制油条和火腿肠(χ2=10.662,P=0.005),上述捕获率差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 自制油条与野鼠鼠疫疫源地优势宿主高山姬鼠的食性偏好高度契合,可作为该地区鼠疫宿主监测的优选诱饵;针对特定鼠种,油条可作为姬鼠属和家鼠属的首选诱饵,苹果则适用于绒鼠属、白腹鼠属、松鼠和树鼩等宿主动物;火腿肠的野外诱捕应用价值仍需进一步评估。
目的 了解云南省江城哈尼族彝族自治县宿主动物及其体表蚤类的物种构成和数量分布情况,评估当地鼠疫传播风险,为制定针对性防控措施提供数据支持。方法 2025年10月选取江城哈尼族彝族自治县5个乡镇,以农村居民区、农耕地、林地为调查生境,采用夹夜法与笼夜法开展宿主动物调查,收集体表寄生蚤样本,分析宿主动物及其体表寄生蚤的群落结构与空间分布特征。采集人、犬及活体宿主动物血液样本,采用间接血凝试验开展鼠疫F1抗体血清学检测;同时对宿主动物脏器组织样本、寄生蚤样本进行鼠疫菌分离培养。结果 本次调查共捕获宿主动物241只,隶属2目4科9属14种,黄胸鼠为优势种,占比70.12%;白尾稍大麝鼩(9.96%)、黑缘齿鼠(5.81%)、锡金小鼠(4.56%)占比相对较高。农村居民区、农耕地、林地生境宿主动物捕获率分别为3.74%、7.69%、10.97%,不同生境捕获率组间差异有统计学意义(χ2=44.678,P<0.001)。各生境两两比较差异均有统计学意义(均Padj<0.05)。低、中、高海拔梯度捕获率分别为6.26%、7.54%、10.07%,海拔梯度间总体差异有统计学意义(χ2=7.564,P=0.023),仅低海拔与高海拔组间捕获率差异有统计学意义(Padj=0.026)。共检获宿主动物体表寄生蚤4科4属4种,合计43匹,印鼠客蚤为优势蚤种,占74.42%;宿主动物平均染蚤率8.30%,平均体蚤指数0.18。共采集人血清574份、犬血清59份、宿主动物血清47份,鼠疫F1抗体检测结果均为阴性;对241份宿主动物脏器样本及43匹寄生蚤样本开展鼠疫菌分离培养,均未检出鼠疫菌。结论 本次调查显示,江城哈尼族彝族自治县近期鼠疫活动处于低水平,但黄胸鼠和印鼠客蚤优势地位明显,居民区鼠捕获率超过3%。该县地处中缅边境,存在境外病原引入及鼠疫流行风险,应重点强化居民区与边境生境的动态监测,控制宿主密度于阈值以下,为早期预警提供依据。
目的 探索智能监测系统在鼠疫自然疫源地啮齿动物群落监测中的应用,为数智防控鼠疫提供科学依据。方法 2024—2025年,在河北省鼠疫自然疫源地康保牧场监测区域内选择6块样地(每年选择3块样地),分别布放鼠害物联网智能监测终端,实时监测啮齿动物群落,定期在鼠害信息网智能监测平台收集数据并进行分析。结果 2024—2025年共监测啮齿动物3科5属8种3 391只次,累计监测1 341 d,平均鼠密度2.53只次/d,其变化趋势为非线性变化(y=-0.078 0x2+0.678 4x+1.486 6,R2=0.396 2);长爪沙鼠、达乌尔黄鼠为优势鼠种,子午沙鼠和黑线仓鼠为常见种。6块样地啮齿动物物种组成生物量不完全相同,样地A、B、D、E的特有鼠种是长爪沙鼠和子午沙鼠,样地C、F的特有鼠种是达乌尔黄鼠。2024年啮齿动物群落多样性指数H=1.04、均匀度指数J=2.02、优势度D=0.43,春季、夏季、秋季优势鼠种是长爪沙鼠,冬季是子午沙鼠;2025年多样性指数H=1.43、均匀度指数J=2.78、优势度D=0.30,春季、夏季优势鼠种是长爪沙鼠,秋季是黑线仓鼠,冬季是子午沙鼠。24 h鼠种数为3.96±1.36,以1时、2时、24时物种最多,均为6种,长爪沙鼠、子午沙鼠24 h均可以活动,二者活动高峰不同。结论 智能监测系统在自然状态下可以反映啮齿动物群落结构、种群密度、群落多样性及季节变化和活动节律,可作为疫源地智能监测的一种手段,实现数智监测新途径,为鼠疫防控提供重要经验借鉴。
目的 分析宁夏回族自治区灵武市长爪沙鼠鼠疫自然疫源地宿主动物及媒介监测指标与气象因素的关联性,为动物鼠疫早期预警和防治提供科学依据。方法 收集2005—2025年灵武市鼠疫监测资料及2003—2025年气象资料,使用Rstudio软件、采用Spearman秩相关分析气象因素与各监测指标在当年、滞后1年、滞后2年的相关性,并用Benjamini-Hochberg法控制错误发现率,进行多重比较校正。结果 2005—2025年,灵武市长爪沙鼠密度范围为0.21~7.01只/hm2,野外夜行鼠捕获率范围为1.12%~6.96%,鼠体蚤指数范围为0.26~2.80,鼠体染蚤率范围为13.04%~63.71%,鼠巢蚤指数范围为0~7.16,鼠巢蚤染蚤率范围为0~96.00%。Spearman秩相关分析得36项原始数据有统计学意义(P<0.05),经Benjamini-Hochberg法校正后共13项有统计学意义(q<0.05),鼠体染蚤率与当年平均地温(rs=0.750 5,q=0.016 2)、当年平均最高气温(rs=0.717 1,q=0.016 2)、当年平均气温(rs=0.696 1,q=0.020 3)、滞后1年平均最高气温(rs=0.738 6,q=0.008 1)、滞后1年平均气温(rs=0.657 1,q=0.024 3)、滞后1年平均地温(rs=0.621 2,q=0.036 5)呈正相关,与滞后2年蒸发量(rs=-0.603 9,q=0.046 1)呈负相关;鼠体蚤指数与当年平均最高气温(rs=0.690 5,q=0.016 2)、当年平均气温(rs=0.649 3,q=0.025 2)、当年平均地温(rs=0.627 6,q=0.033 9)呈正相关;年均鼠巢蚤染蚤率与滞后2年降水量(rs=0.668 0,q=0.024 3)呈正相关,与滞后2年蒸发量(rs=-0.664 1,q=0.023 1)呈负相关;年均夜行鼠捕获率与滞后2年平均最低气温(rs=0.636 3,q=0.030 8)呈正相关。结论 灵武市鼠疫自然疫源地内蚤类变化受温度型指标及降水量的正向驱动,受蒸发量的反向驱动;长爪沙鼠密度变化与气象因素无显著相关性;建议鼠疫监测中应注意气温与降水异常变化,提前采取相关防控措施,提升鼠疫早期预警能力。
目的 总结分析2019—2024年内蒙古自治区(内蒙古)人间及动物间鼠疫疫情流行特点,为今后开展鼠疫监测预警和精准防控人间鼠疫发生、流行提供依据。方法 全面收集2019—2024年内蒙古人间鼠疫病例的数据及同时期动物鼠疫监测数据,采用描述性统计学方法,通过SPSS 29.0软件进行统计,综合分析近年来内蒙古地区鼠疫疫情发生发展的流行特点。结果 2019—2024年,内蒙古连续6年发生人间和动物间鼠疫的流行,在5个盟(市)的9个旗(县、区、县级市)发生了人间鼠疫,共发生人间鼠疫15例,死亡4例,死亡率为26.67%;15例病例集中发生在3个月份,7月2例、8月8例、11月5例;男性7例,女性8例;平均年龄49.9岁;14例为放牧人员,1例为外来务工人员。共发现3种感染方式,被染疫跳蚤叮咬10例,人与人之间通过飞沫或空气传播3例,剥食染疫蒙古兔2例;临床类型方面,腺鼠疫5例,腺鼠疫继发败血型鼠疫5例,原发型肺鼠疫3例,腺鼠疫继发肺鼠疫2例。在7个盟(市)的22个旗(县、区、县级市)发现流行强度不等的动物鼠疫流行,6年间动物鼠疫发生的旗(县、区、县级市)数,占内蒙古总疫源旗(县、区、县级市)数的40.74%;共检出鼠疫菌295株,其中从6属7种宿主动物中检出鼠疫菌242株,从6属6种媒介昆虫中检出鼠疫菌53株;从3属4种宿主动物中检出阳性血清22份。结论 2019—2024年内蒙古地区的鼠疫流行强度大,范围广,表现出了一些新的特点,建议内蒙古自治区今后进一步加强鼠疫监测预警和精准防控工作,严防发生人与人之间的鼠疫传播。
目的 分析宁夏灵武市2023年一起动物鼠疫疫情的应急处置经验,为鼠疫自然疫源地的防控工作提供实践参考。方法 采用现场流行病学调查、宿主动物与媒介监测、实验室检测相结合的方法,对疫情发生概况、宿主媒介种群特征及应急处置措施进行系统分析。结果 本次动物鼠疫疫情共判定疫点1个,划定疫区面积707 hm2,从子午沙鼠及其寄生蚤体内分离出鼠疫菌2株,检出鼠疫F1抗体阳性样本7份、核酸阳性样本3份;宿主动物共调查11 hm2,捕鼠40只,平均鼠密度3.64只/ hm2;夜行啮齿动物调查共布夹400盘,捕鼠34只,平均捕获率8.50%;媒介蚤类调查共梳检鼠74只,染蚤鼠57只,染蚤率77.03%,获蚤261匹,蚤指数3.53匹/只。此次疫情依托常规监测早期发现,经三级联动机制落实人员管控、灭鼠灭蚤、健康宣教等综合处置措施,于一个最长潜伏期内扑灭疫情,未发生扩散。结论 常态化鼠疫监测体系的高效运转是实现疫情早期识别与预警的核心支撑,及时有效处置动物鼠疫疫情是鼠疫防控防线和保障公共卫生安全的关键环节。本次疫情提示灵武市鼠疫自然疫源地存在扩散风险,子午沙鼠在当地鼠疫传播中具有重要流行病学意义;鼠疫监测需建立多维度监测体系,采用抗体检测、病原分离与分子生物学检测相结合的联合检测策略,提升疫情识别灵敏度。
目的 测定不同性别与日龄白纹伊蚊(Aedes albopictus)成虫的飞行能力参数,揭示其飞行能力的日龄动态与性别分化规律,为精准防控提供科学依据。方法 在恒温、恒湿及固定光周期条件下,采用飞行磨吊飞技术系统测定白纹伊蚊实验室品系1~10、15、20、25日龄雌雄成虫的单次最远飞行距离、单次最长飞行时间和单次最远飞行距离的平均飞行速度3项参数,并对数据进行非参数检验及秩变换双因素方差分析。结果 性别对白纹伊蚊单次最远飞行距离影响显著(U=50 497.50,Z=3.136,P=0.002),雌蚊平均单次飞行距离194.99(95%CI:154.67~237.54)m,显著高于雄蚊[130.20(95%CI:102.42~164.04)m]。日龄对白纹伊蚊单次最远飞行距离存在显著影响(H=24.073,df=12,P=0.020),雄蚊2日龄达到最高峰(305.67 m),雌蚊3日龄达到最高峰(363.82 m)。日龄与性别对白纹伊蚊单次最远飞行距离的交互效应不显著(F=1.549,df=12,P=0.103)。日龄对单次最长飞行时间(H=25.056,df=12,P=0.015)和单次最远飞行距离的平均飞行速度(H=21.381,df=12,P=0.045)均有显著影响,而性别对单次最远飞行距离的平均飞行速度有显著影响(U=58 450.5,Z=6.948,P<0.001),对单次最长飞行时间无显著影响(U=41 910.00,Z=-0.981,P=0.327)。结论 白纹伊蚊飞行能力存在显著的性别差异与日龄分化,雌蚊平均飞行距离明显远于雄蚊;雌蚊3日龄、雄蚊2日龄为各自单次最远飞行日龄;提示可参考雌蚊3日龄扩散活跃窗口期和其他吸血后日龄单次最远飞行距离划定成蚊监测范围及应急控制区域。
目的 探究埃及伊蚊(Aedes aegypti)离子型受体(ionotropic receptors, IRs)中与蚊虫血液识别相关的调谐受体IR7a与潜在共受体IR25a、IR76b的互作关系及生理关联。初步评估IR7a-共受体复合体的样品质量,为后续冷冻电镜结构解析提供可靠的样品基础与实验依据。方法 使用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR, qPCR)构建IR7a、IR25a、IR76b的时空表达谱。构建携带不同标签的重组质粒,在哺乳动物表达系统中共表达IR7a与IR25a/IR76b,通过亲和层析和凝胶过滤层析纯化目的蛋白,结合蛋白免疫印迹(Western blot)验证体外互作关系,并通过负染电镜初步表征2组复合物的结构形态。结果 IR7a、IR25a、IR76b在埃及伊蚊雌性个体发育阶段表达量逐渐上升,在埃及伊蚊吸血相关时期和组织中呈特异性表达,并在吸血后表达量呈现下降趋势。3个基因在未吸血雌蚊的口器、触角、腿部均有较高的表达量,且共受体基因IR25a、IR76b在蚊虫组织的表达模式相似。互作检验结果显示,体外表达的IR7a分别与IR25a/IR76b存在蛋白质互作,且复合体结构与同家族的离子型谷氨酸受体具有相似性。负染电镜结果显示,IR7a-IR25a和IR7a-IR76b复合体呈现出离子型受体家族的典型结构特征。结论 IR7a可能通过与IR25a/IR76b组成离子型受体复合物参与血液识别过程,体外表达与生化互作结果进一步支持IR7a与IR25a/IR76b之间存在相互作用。本研究为后续IR7a-共受体复合体的高分辨率结构解析提供了样品基础,并为揭示埃及伊蚊识别宿主和血液的分子机制提供了重要线索。
目的 分析武汉市老年利福平耐药肺结核患者的流行特征及治疗转归情况,为科学制定本地化防控策略提供参考。方法 通过“中国疾病预防控制信息系统”子系统“传染病登记管理信息系统”,采集武汉市2017—2025年 ≥60岁老年利福平耐药肺结核患者的病案信息,采用描述性方法分析其流行特征,并运用χ2检验或Fisher确切概率法分析患者纳入治疗情况,采用多因素logistic回归分析患者治疗转归影响因素。结果 武汉市2017—2025年累计登记老年利福平耐药肺结核患者468例(男性367例、女性101例),占全人群登记数的29.07%。该人群年度登记率均高于全人群,年均递降率为3.69%,低于全人群的6.69%,总体呈下降趋势(χ2趋势=11.300,P<0.001)。老年患者以本地户籍为主(81.20%),多分布于近城区(65.38%),初治患者(54.70%)多于复治患者(45.30%)。2017—2023年老年患者纳入治疗率为80.72%(293/363),呈上升趋势(χ2趋势=37.207,P<0.001),确诊年份较早、年龄较长、流动人口、有既往抗结核史和单耐利福平的老年患者纳入治疗率较低。老年人群治疗成功率仅44.37%(130/293),多因素logistic回归分析结果显示,本地户籍(OR=2.531,95%CI:1.172~5.465,P=0.018)、治疗方案含贝达喹啉(OR=2.003,95%CI:1.077~3.727,P=0.028)是老年患者成功治疗结局的保护因素。结论 武汉市老年利福平耐药肺结核登记率呈下降趋势,但在全人群中的构成比有所上升,老年患者纳入治疗率较高,但治疗成功率仍处于较低水平,防控形势仍较严峻。今后治疗管理应重点关注老年男性、流动人口及复治患者,建立针对老年患者的个体化支持体系。
目的 分析鱼腥草精油的化学成分,评价鱼腥草精油及其主要活性成分甲基正壬酮对斯氏按蚊幼虫和成蚊的杀虫效果。方法 采用水蒸气蒸馏法提取鱼腥草精油,通过气相色谱-质谱联用技术(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)分析其化学成分;采用Probit分析法测定鱼腥草精油及其主要成分甲基正壬酮对斯氏按蚊3龄幼虫的杀虫效果,采用密闭熏蒸法测定两者对成蚊的熏杀效果。结果 GC-MS分析共鉴定出鱼腥草精油含有甲基正壬酮、β-蒎烯、β-月桂烯等15种主要成分。根据线性回归方程,鱼腥草精油在处理幼虫后6、12、24 h的半数致死浓度(median lethal concentration, LC50)分别为89.125、82.414、80.910 μL/L;在2、4、6、8、10 μL/L浓度下对成蚊半数击倒时间(median knockdown time, KT50)分别为13.732、11.505、9.523、8.210、6.794 min,熏蒸后恢复24 h的死亡率均为100%。甲基正壬酮在处理幼虫后1、3、6 h的LC50分别为21.488、17.319、15.580 µL/L;在1、2、3、4、5 µL/L浓度下对成蚊KT50分别为18.808、14.558、9.522、8.339、5.791 min,熏蒸后恢复24 h的死亡率随药物浓度增高而呈现上升趋势。结论 鱼腥草精油及其主要活性成分甲基正壬酮对斯氏按蚊幼虫和成蚊均具有显著的杀虫活性,具有开发为植物源性杀虫剂的潜力。
目的 探讨丹酚酸C(salvianolic acid C, SAC)是否对泡球蚴(Echinococcus multilocularis, Em)感染引起的小鼠肝纤维化具有改善作用,为泡球蚴病提供潜在的治疗策略。方法 选取C57BL/6雌性小鼠,随机分为对照组(6只)和泡球蚴感染组(12只)进行模型建立。小鼠感染至第7周的第1天时,将泡球蚴感染小鼠再随机平分为模型组和给药组,每组6只,并对对照组及给药组开始连续给溶剂和药物2周。不同组都处理8周,采集小鼠肝脏组织及血清。检测肝功能指标AST和ALT水平;苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、天狼星红染色和Masson染色检查肝脏组织病理学变化;免疫组织化学法检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smooth muscle actin, α-SMA)、胶原Ⅰ(collagen type I, COL1A1)表达情况,检测肝纤维化程度;RT-qPCR和Western blot检测小鼠肝脏组织中α-SMA、COL1A1和胶原Ⅲ(collagen type Ⅲ, COL3A1)mRNA及蛋白表达。结果 与对照组相比,模型组血清AST和ALT活性显著升高(均P<0.05),提示成功诱导肝细胞损伤;而SAC给药组上述指标显著降低[FAST(2,15)=9.94,P<0.05;FALT(2,15)=20.34,P<0.05]。肝组织病理显示,SAC能显著减轻模型组中出现的炎症细胞浸润、肝细胞坏死及胶原沉积。天狼星红染色中,模型组纤维化面积为(12 585.00±1 467.00)μm2,SAC组降至(8 181.00±1 627.00)μm2;3组差异有统计学意义(F=149.70,P<0.05);Masson染色结果一致,模型组纤维化面积为(15 817.00±2 412.00)μm2,SAC组为(10 346.00 ±1201.00)μm2;3组差异有统计学意义(F=150.20,P<0.05)。免疫组化与分子生物学检测进一步表明,模型组中α-SMA[面积(11 501.00±3 777.00)μm2]和COL1A1[面积(5 800.00±616.80)μm2]表达显著上升,SAC干预后分别降至(5 940.00±1 744.00)μm2与(3 465.00± 1 057.00)μm2(均P<0.05)。RT-qPCR与Western blot结果显示,SAC可显著抑制α-SMA、COL1A1及COL3A1在mRNA和蛋白水平的上调(均P<0.05)。结论 SAC可有效缓解Em感染引起的肝损伤与纤维化进程,表明SAC具有作为抗肝纤维化药物的开发潜力。
目的 系统评价荧光PCR熔解曲线法分枝杆菌鉴定试剂盒(Myco检测)在临床样本中的诊断性能,并比较其与其他6种常用结核分枝杆菌检测方法的一致性特征,为临床实验室合理应用该方法提供依据。方法 收集2022—2025年西安市胸科医院疑似结核病患者的412份临床样本,分别采用Myco检测、MTB-DNA荧光PCR检测、MTB/NTM-DNA荧光PCR检测、MTB-DNA恒温检测、MTB-RNA恒温检测、Xpert检测和培养检测进行检测。分析各方法的阳性率、以培养为金标准的诊断性能、以临床诊断为金标准的诊断性能,并对各检测方法间进行一致性分析。结果 412份样本中痰液占70.9%(292/412),肺泡灌洗液占26.7%(110/412)。以培养为金标准,Myco检测灵敏度最高(97.73%),MTB-RNA恒温检测特异性最高(98.40%)。以临床诊断为金标准,Myco检测的特异性为98.18%(54/55),阳性预测值为99.33%(149/150)。在211份7种检测方法均完成的样本中,所有方法两两间的 Kappa 一致性系数为0.62~ 0.89(平均0.77)。共有64例(30.3%)样本被全部7种方法判为阳性,95例(45.0%)全为阴性,合计75.4% 的样本呈现完全一致的结果模式。值得注意的是,Myco检测额外检出3例仅本方法为阳性的样本,而其他方法中仅MTB/NTM-DNA荧光PCR检测有2例类似情况。结论 Myco检测具有较好的特异性和阳性预测值,其阳性结果具有良好的诊断确定性与临床可操作性。临床实践中应根据检测目的选择合适方法或组合策略,在需要高确定性阳性结果的场景中可优先采用Myco检测。
目的 利用全基因组分析2024年海南省沙门菌血清型分布、耐药基因携带情况及基因型特征,了解沙门菌的病原变化规律,为暴发溯源及防控提供科学依据。方法 收集2024年海南省人群感染性腹泻及食源性疾病监测体系分离的沙门菌,开展全基因组测序;通过SISTR、ResFinder、PubMLST数据库分别预测血清型、分析耐药基因及确定序列型(ST);采用Snippy软件提取核心基因组单核苷酸多态性(cgSNP),结合FastTree构建系统发育进化树,分析菌株流行特征及聚集性规律。结果 2024年海南省共获得沙门菌240株,共检出34个血清型,优势血清型为单相鼠伤寒沙门菌44株(占18.3%)、韦太夫雷登沙门菌24株(占10.0%)和肯塔基沙门菌21株(占8.7%),人源与食品源菌株优势血清型存在明显差异。检出42种ST型,ST34、ST365、ST11为优势型;检出11类76种耐药基因(点突变),多重耐药株占比54.17%,以单相鼠伤寒沙门菌、肯塔基沙门菌、鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌为主。系统发育分析发现16个基因组聚集簇,经流行病学调查证实2起为实际暴发,多重耐药菌株存在潜在暴发风险。结论 2024年海南省沙门菌优势血清型为单相鼠伤寒沙门菌,多重耐药率升高且暴发事件增多,建议开展系统性的病原遗传特征及流行特征分析,识别海南省沙门菌传播路径、关键耐药基因流行变异规律及感染危险因素,为精准防控沙门氏菌感染提供有力支撑。
目的 分析石家庄地区河北省儿童医院2021—2025年住院儿童人冠状病毒(human coronavirus, HCoV)流行病学特征,为石家庄地区HCoV防控提供科学依据。方法 收集2021—2025年在河北省儿童医院因急性呼吸道感染住院并接受HCoV核酸检测的患儿67 660例,对HCoV阳性病例的流行病学和临床资料(时间、性别、年龄、季节等)进行描述性研究分析,对13种呼吸道病原体进行多重检测。结果 HCoV总检出率为2.38%(1 610/67 660),其中男性患儿为2.37%(930/39 190),女性患儿为2.39%(680/28 470),性别比较差异无统计学意义(χ2=0.017,P=0.897)。不同年龄组间总检出率(χ2=56.428,P<0.001)、单一检出率(χ2=43.801,P<0.001)和混合检出率(χ2=42.869,P<0.001)差异均有统计学意义。其中总检出率1~<3岁组高于其他3组;6~≤18岁组低于其他3组;单一检出率<1岁组和1~<3岁组高于其他2组;混合检出率1~<3岁组和3~<6岁组高于其他2组。2022年和2023年检出率高于其他3年(χ2=229.447,P<0.001),夏季检出率高于其他季节(χ2=335.266,P<0.001)。解除新型冠状病毒常态化防控后总检出率(χ2=6.084,P=0.014)和混合检出率(χ2=16.917,P<0.001)高于新型冠状病毒常态化防控期间。HCoV与其他呼吸道病原体的混合检出率为60.50%(974/1 610),混合检出中同时检出2种病原体数量最多(46.58%,750/1 610),其中以HCoV+人鼻病毒(30.40%,228/750)和HCoV+肺炎支原体(26.27%,197/750)组合混合检出多见。HCoV检出阳性患儿中,肺炎为主要临床诊断。结论 HCoV是石家庄地区儿童急性呼吸道感染的常见病原体,1~<3岁组儿童在夏季多发,解除新型冠状病毒常态化防控后总检出率和混合检出率高于新型冠状病毒常态化防控期间,常与其他呼吸道病原体混合检出,其中以HCoV+人鼻病毒和HCoV+肺炎支原体组合多见。
目的 探讨广州市乙型流感病毒的流行和基因进化特征,为及时开展监测预警提供基础数据。方法 分析2023年8月—2026年4月广州地区哨点医院监测病例的流行病学特征,对其中45份阳性样本进行乙型流感病毒全基因组扩增和测序,并对血凝素(Hemagglutinin, HA)和神经氨酸酶(Neuraminidase, NA)进行基因特征分析。结果 共收集2023年8月—2026年4月广州地区哨点监测病例的鼻咽拭子样本共6 190份,检出乙型流感病毒165份,总阳性率为2.67%。广州地区乙型流感病毒高发于6~<18岁青少年人群,2023年11月出现流行高峰后,2026年初再次呈现流行上升趋势。随机选择45株乙型流感病毒进行HA和NA基因系统进化分析,45株流行株均为B/Victoria谱系V1A.3a.2分支,随时间推移流行株进化分支呈现多样化进化趋势,优势流行分支由HA-C.5.7和NA-B.7向HA-C.5.6和NA-B.8分支转变。在氨基酸位点上,HA蛋白抗原决定区发生H131D、K143G、D144N及E195K等突变,受体结合域发生143、144、195位氨基酸替换,所有毒株均出现N209号糖基化位点缺失;所有毒株NA蛋白I395V和I459V耐药位点均发生突变,基于药物结合自由能的预测结果显示,I395V和I459V突变导致对奥司他韦、扎那米韦、帕拉米韦的相对结合自由能均大于零,提示潜在耐药风险。在氨基酸位点突变分析上,NA蛋白氨基酸突变率最高为6.22%,MP蛋白突变率最低为1.61%。结论 广州地区乙型流感自2024年6月持续低水平流行,2026年初开始呈现流行上升态势且优势进化分支发生转变,并携带有耐药性突变,建议加强乙型流感病毒抗原性与耐药性变异监测。
目的 探讨龙血素B调控半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3, Caspase-3)/消皮素E(gasdermin E, GSDME)信号通路对脑梗死大鼠神经元焦亡的影响及作用机制,以期为龙血素B治疗缺血性脑卒中提供实验依据。方法 将SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、龙血素B低剂量组(5 mg/kg)、龙血素B高剂量组(20 mg/kg)、依达拉奉组(3 mg/kg)、Caspase-3抑制剂(Z-DEVD-FMK)组(0.5 μg/mL,10 μL)及龙血素B高剂量+Caspase-3激活剂(PAC-1)组(20 mg/kg+3.5 mg/kg),每组27只。采用改良Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型,假手术组仅分离动脉。末次给药后,采用Zea-Longa评分评估神经功能;ELISA测定血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18水平;2,3,5-氯化三苯基四氮唑染色(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride, TTC)染色测定脑梗死面积百分比;干湿重法计算脑含水量;苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)观察脑组织病理形态;透射电镜观察神经元超微结构;通过神经元特异性核蛋白(neuronal nuclei, NeuN)与消皮素E N端片段(GSDME-N)的双重免疫荧光标记,检测神经元焦亡;蛋白质印迹法(Western blot)检测剪切型Caspase-3(Cleaved-Caspase-3)、Caspase-3、GSDME-N、GSDME、IL-1β、IL-18蛋白表达。结果 与假手术组相比,模型组大鼠Zea-Longa评分、血清IL-1β及IL-18水平、脑梗死面积百分比、脑含水量升高,NeuN+/GSDME-N+神经元细胞数增多,脑组织Cleaved-Caspase-3、GSDME-N、IL-1β、IL-18蛋白表达升高(P<0.05)。与模型组相比,龙血素B低剂量组、龙血素B高剂量组、依达拉奉组及Z-DEVD-FMK组上述指标均显著降低(P<0.05)。与龙血素B高剂量组相比,龙血素B高剂量+PAC-1组上述指标均显著升高(P<0.05)。形态学显示,模型组神经元排列紊乱、皱缩、空泡化,电镜见典型焦亡改变;龙血素B高剂量组神经元损伤及焦亡特征明显减轻;龙血素B高剂量+PAC-1组损伤及焦亡加重。结论 龙血素B可能通过抑制Caspase-3/GSDME通路减轻脑梗死大鼠神经元焦亡,从而发挥神经保护作用。
目的 探究HIV感染者/AIDS患者(people living with HIV/AIDS,PLWHA)中结核分枝杆菌潜伏感染(latent tuberculosis infection, LTBI)的影响因素,通过构建限制性立方样条模型探究PLWHA的免疫指标与LTBI风险之间的剂量-反应关系。方法 于2023年7—12月在无锡市招募PLWHA,根据QuantiFERON-TB Gold In-Tube检测结果分为LTBI组和非LTBI组,系统收集患者基本信息和临床资料。分析PLWHA中发生LTBI风险的影响因素。通过限制性立方样条(restricted cubic splines, RCS)分析CD4+T淋巴细胞(简称CD4细胞)计数与CD8+T淋巴细胞(简称CD8细胞)计数以及CD4/CD8细胞比值与LTBI风险的剂量-反应关系。结果 共纳入675名PLWHA,LTBI阳性率为7.7%。其中男性620例,女性55例。单因素分析显示年龄和CD4/CD8细胞比值是LTBI风险的影响因素,多因素分析结果显示,45~<60岁年龄组(OR=2.115,95%CI:1.136~3.938,P=0.018)和CD4/CD8细胞比值≥1(OR=2.014,95%CI:1.106~3.667,P=0.022)是LTBI的独立影响因素。限制性立方样条模型显示:随着CD4细胞计数的增加,LTBI风险呈先升后降的趋势;而随着CD8细胞计数的增加,LTBI风险呈持续下降的趋势;随着CD4/CD8细胞比值增加,LTBI风险呈逐渐升高的非线性趋势。结论 在PLWHA人群中,45~<60岁中年患者LTBI风险更高,结核分枝杆菌潜伏感染筛查应重点关注此类人群,以便早期识别并及时进行预防性治疗,降低发展为活动性结核病的风险。对于CD4/CD8细胞比值较低的PLWHA,应联合其他结核感染相关特异性检测方法进行LTBI筛查。
抗逆转录病毒治疗虽能有效控制人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1, HIV-1)复制,却无法彻底清除病毒,根本原因在于HIV-1储存库的长期存在及其异质性。传统的群体水平分析方法受限于分辨率,难以全面揭示病毒储存库的细胞异质性、转录动态及克隆演化特征。本文系统综述单细胞测序技术在HIV-1感染者中应用的三大研究方向:(1)病毒储存库的特征解析;(2)免疫病理机制的深入阐释;(3)新型治疗策略的临床前评估。单细胞RNA测序、单细胞ATAC测序、单细胞VDJ测序和多组学联合分析技术的应用,已成功绘制HIV-1感染者的免疫细胞图谱,鉴定出新的潜伏标志物和免疫调节通路。空间转录组学进一步将研究维度拓展至组织微环境,揭示了中枢神经系统等解剖部位的病毒库特性。同时,单细胞水平的基因编辑评估技术为CRISPR/Cas9抗HIV-1治疗的精准优化提供了关键工具。尽管当前技术仍面临罕见细胞捕获效率、生物信息学定义标准化等挑战,单细胞多组学与功能验证的整合研究将为最终实现HIV-1功能性治愈提供重要的理论依据和技术支撑。
目的 分析石家庄市首例发热伴血小板减少综合征(severe fever with thrombocytopenia syndrome, SFTS)病例感染来源,通过传播媒介调查与重点人群血清学监测分析大别班达病毒(Dabie bandavirus, DBV)传播风险,为SFTS的防控提供经验与依据。方法 对2024年石家庄市首例SFTS病例进行流行病学调查,采集感染来源乡镇及周边乡镇游离蜱与寄生蜱,采用荧光定量PCR方法进行DBV核酸检测;采集平山县2个乡镇常住健康居民血清样本,采用酶联免疫吸附试验进行DBV IgG抗体检测。结果 病例DBV核酸阳性,IgM抗体阳性,病原体高通量测序检出DBV序列7 412条。临床表现主要为发热、血小板与白细胞减少以及腹泻等消化道症状,经治疗后痊愈,无续发病例。该病例有明确野外环境暴露史与疑似蜱虫叮咬史,感染来源为平山县山林地区。2025年共监测到1 380只蜱虫,在寄生蜱中检出DBV核酸阳性的长角血蜱;蜱密度监测发现蜱虫主要活跃于3—5月份,4月份为活跃高峰。共采集300例乡镇居民血样本,DBV IgG抗体阳性10人,阳性率3.33%,不同乡镇环境人群抗体阳性率差异有统计学意义(P<0.05)。结论 石家庄市首例SFTS病例由农村山林地区旅居感染,农村环境中存在蜱虫传播疾病的风险,重点人群存在SFTS既往感染的可能,提示今后应做好媒介生物控制工作,开展健康宣传,提升重点人群防病与就诊意识,加强基层医疗机构疾病识别与诊断能力。
本文报道1例利福平耐药肺结核合并糖尿病患者在抗结核治疗中发生吡嗪酰胺相关性溶血性贫血的诊治过程。患者因咳嗽、咳痰伴发热就诊,当地县医院痰GeneXpert检测示利福平耐药,转入云南省传染病医院后复查结果一致,痰GeneXpert XDR检测示结核分枝杆菌阳性,且对异烟肼、氟喹诺酮类、二线注射类药物(阿米卡星/卡那霉素/卷曲霉素)及乙硫异烟胺敏感。使用短程抗结核治疗方案:[4~6 Am-Mfx-Pto-Cfz-Z-H↑-E/5Mfx-Cfz-Z-E(Am.阿米卡星;Mfx. 莫西沙星;Pto.丙硫异烟胺;Cfz.氯法齐明;Z.吡嗪酰胺;H↑.高剂量异烟肼;E.乙胺丁醇)]治疗1周,血红蛋白从128 g/L降至68 g/L,伴网织红细胞、胆红素、乳酸脱氢酶等升高,且尿潜血阳性、尿胆红素阳性,符合溶血性贫血诊断;停用抗结核药物后血红蛋白恢复,再次入院治疗仍发生贫血,经用药排查明确贫血为吡嗪酰胺所致。本病例提示使用吡嗪酰胺存在诱发溶血性贫血的风险,需严密监测患者的病情变化,及早发现并停药可有效缓解贫血;本报告为基层医疗机构对吡嗪酰胺的罕见不良反应溶血性贫血的早期识别及诊治提供参考依据。