目的 利用同源重组技术将柯萨奇病毒A16型(Coxsachievirus A16, CA16)VP1基因重组入枯草芽孢杆菌基因组,进而将VP1蛋白展示在芽孢表面制备CA16粘膜疫苗。将疫苗滴鼻方式免疫小鼠,检测小鼠血清中VP1特异性抗体滴度,体外中和实验检测抗体的保护作用。方法 将枯草芽孢杆菌CotB基因与VP1基因连接后插入整合质粒pDG1662得到重组质粒pDG1662-CotB-VP1,电转化法将线性化重组质粒转化枯草芽孢杆菌1A771,抗生素抗性筛选,PCR、Western-Blot、免疫荧光鉴定VP1基因重组及蛋白表达情况。将该疫苗滴鼻免疫小鼠,ELISA法检测血清抗体滴度,体外中和实验分析该抗血清的中和活性。结果 VP1基因成功重组入枯草芽孢杆菌基因组中并将蛋白展示在芽孢表面。该疫苗免疫小鼠后有效的诱导了小鼠体液免疫反应,并且该抗血清在体外中和实验中表现了较好的中和活性。结论 CA16 VP1蛋白展示在枯草芽孢杆菌芽孢表面制备的疫苗能刺激小鼠产生具有保护作用的中和抗体,为研制CA16粘膜疫苗奠定了基础。
目的 分析2012—2016年珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况与脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型。方法 将腹泻病人的粪便进行沙门菌分离培养,生化鉴定和血清学分型,采用药敏纸片法(K-B法)进行12种抗生素的耐药试验。根据美国PulseNet实验室推荐的沙门菌PFGE分型试验方案进行分子分型。结果 分离培养共获得斯坦利沙门菌108株,检出高峰期在7—10月,主要感染人群是小于1岁的幼儿(55.6%),感染病例男女比为1.84∶1。药敏试验显示本地斯坦利沙门菌对庆大霉素、三代和四代头孢类抗生素及环丙沙星较为敏感,对复方磺胺类抗生素耐药率为64.8%(70/108),对氨苄青霉素、萘啶酮酸、四环素、氯霉素和链霉素呈现低水平的耐药(10.2%~16.7%),但对链霉素的中度敏感率为68.5%,有18株(16.7%)菌呈多重耐药。108株菌经PFGE分型分为6个聚类簇,共获得66种带型,每种带型包含菌株数1~21株不等,相似值在62.4%~100%,优势带型为ST15(21株)和ST18(10株)。结论 珠海市斯坦利沙门菌的耐药情况较为乐观,但对磺胺类抗生素耐药率比较高,也出现多重耐药株,需继续加强监测。斯坦利沙门菌遗传基因多样性,多重耐药株的型别多样,菌株来源广泛。
目的 了解常用菊酯类杀虫剂商品对海口市白纹伊蚊群体的杀虫效果。方法 采集海口市白沙门公园等地的白纹伊蚊幼虫,带回实验室饲养至成蚊作为试虫,应用玻璃药膜法检测15种常见市售杀虫剂对其的杀虫效果,并应用接触筒法检测其对0.1%溴氰菊酯的敏感性。结果 氯氰菊酯等11种杀虫剂对海口市白沙门公园的白纹伊蚊群体杀虫效果显著,混配的杀虫剂30 min击倒率和24 h死亡率均为100%;效果不显著的有4种,有效成分分别是高效氯氟氰菊酯、顺式氯氰菊酯和溴氰菊酯,效果最差的是溴氰菊酯(击倒率为17%,死亡率为34%)。溴氰菊酯对海口其他地区的白纹伊蚊群体,除干家村外,击倒率和死亡率至少有1项未达到标准,效果不显著。接触筒法测定在3个时间点采集的白沙门公园白纹伊蚊群体对0.1%溴氰菊酯的敏感性,结果显示受试蚊虫均已产生抗性。结论 海口市多个地区的白纹伊蚊群体对溴氰菊酯、高效氯氟氰菊酯和顺式氯氰菊酯类杀虫剂商品的效果不明显,对氯氰菊酯等11种杀虫剂商品效果显著。在未来的蚊虫控制中,应加强对杀虫剂的抗药性监测,合理使用杀虫剂。
目的 调查韶关市分散式供水中大肠埃希菌的污染及其耐药情况,及时发现水性传染源,为保障公共卫生安全提供科学依据。方法 采集市内山泉水、井水、储水池水、水库水和溪(河)水等5种水样共计120份,依据GB/T 5750-2006《生活饮用水标准检验方法》进行菌落总数、总大肠菌群、耐热大肠菌群、大肠埃希菌4个微生物项目的检测,对检出的大肠埃希菌进行抗生素耐药性检测,并对实验结果进行统计分析。结果 120份水样中有42份微生物学指标均合格,总合格率为35.0%,检出大肠埃希菌42株,其中7株为致腹泻大肠埃希菌。85.7%的大肠埃希菌对21种抗生素的一种或几种具有耐药性,42.9%的菌株呈多重耐药性,5株为产ESBLs大肠埃希菌。结论 韶关市分散式供水的水质情况不容乐观,不同水源中存在不同比例的致病性和耐药性大肠埃希菌,市民应谨慎选择饮用水源,饮用前应消毒处理。相关部门应加强管理和提供健康教育, 确保居民饮水安全。
目的 了解深圳市男男性行为者(men who have sex with men, MSM)个体性网络大小及其对感染梅毒的影响,为男男性行为者采取干预措施降低梅毒感染风险提供新的视角。方法 2014—2016年深圳市南山区慢性病防治院采用外展干预和男同彩虹门诊相结合的方式对男男性行为者开展匿名自填式问卷调查,收集男男性行为者基本人口学、行为学、性网络特征及梅毒知识知晓情况,开展HIV、梅毒检测,通过卡方检验、Logistic回归探索该人群性行为、性网络与梅毒的相关性。结果 共调查429名男男性行为者,梅毒检测阳性率9.1%。平均年龄(27.2±5.8)岁;汉族占98.1%;文化程度大专以上占70%;户籍是外省的占一半以上;约50%在深圳居住时间在半年以内;梅毒预防知识知晓率较低,仅70.2%。个体性网络大小做单因素分析,年龄(P=0.009)、文化程度(P=0.012)、在深居住时间(P=0.002)、最近6月与男性发生肛交时安全套的使用情况(P=0.041)、梅毒知识知晓情况(P=0.047)均与最近6月个体性网络大小情况有统计学意义。梅毒感染单因素分析文化程度、最近6月个体性网络大小、最近6月与男性发生肛交时安全套使用情况与感染梅毒有统计学意义;多因素分析显示个体性网络大小为15人以上(adjusted OR=3.383,95%CI=0.997~23.030)是感染梅毒的危险因素;最近6月与男性发生肛交时每次使用安全套(adjusted OR=0.059,95%CI=0.011~0.305)是感染梅毒的保护因素。结论 MSM人群是梅毒的一个易感人群,感染梅毒会增加感染HIV的风险,预防HIV和梅毒需同步。性网络作为传播HIV/STI桥梁的同时也是预防的关键,通过性网络建立同伴健康教育干预方法是预防性病的重要措施。
目的 了解海南省2016年有毒有害作业工人的职业健康状况,明确今后职业卫生监管的重点,为政府部门制定适宜于海南省的职业病防治策略提供依据。方法 收集海南省2016年有毒有害作业工人职业健康检查资料,采用Excel和SPSS 19.0统计分析。结果 2016年海南省共有382家企业52 890名工人进行了职业健康检查,企业受检率为23.42%,人员实检率为61.73%,共检出职业健康异常461例,总检出率为0.87%,其中包括疑似职业病56例(0.11%)和职业禁忌证405例(0.77%);疑似职业病检出病例主要分布在微型和小型企业、私有企业、采矿业、建筑业和噪声暴露企业;不同经济类型企业、不同规模企业、不同职业病危害企业人员实检率、职业健康异常总检出率、疑似职业病检出率和职业禁忌证检出率之间的差异均具有统计学意义。洋浦经济开发区疑似职业病检出率高于其他市县(0.16%)。结论 海南省职业病危害企业受检率较低,受检企业中微型和小型企业、私有企业、采矿业和建筑业、涉噪企业职业病危害较严重。政府部门应加强管理,加大对职业健康检查工作的监督力度,确保劳动者的健康。
目的 调查海南地区女性人乳头瘤病毒(HPV)感染现状及亚型分布情况。方法 采用反向斑点杂交-基因芯片技术对海南地区到医院妇科就诊的2 939例女性患者采集宫颈脱落细胞标本进行23种HPV亚型检测。结果 HPV感染阳性共检出652例,阳性率为22.18%,其中单一感染占78.83%,高危型感染占84.08%,主要为HPV52(20.40%),HPV58(11.20%),HPV16(11.08%)。HPV感染阳性率以≤20岁组最高,为33.33%,>50岁组其次,为26.59%,呈“U”形分布。海南与其他地区HPV感染情况对比,具有显著区别。感染率最高的前三位HPV亚型均为52、58、16,但各地区这三个亚型的感染率及排列顺序都具有较大差别,HPV感染具有地域差异。北京、沈阳、重庆、长沙等地区感染率最高的是HPV16亚型,杭州、南宁、河源地区感染率最高的是HPV52亚型,与海南地区一致。结论 海南地区女性HPV感染以单一型感染为主,高危型HPV52、HPV58和HPV16为本地区女性HPV感染主要亚型。HPV基因型分布的研究对当地宫颈癌防治有较好的指导意义。
目的 了解长沙市农村饮用水卫生状况和变化趋势,为农村饮用水安全管理工作提供依据和技术支持。方法 依据《生活饮用水标准检验方法》(GB/T 5750-2006)对2014—2016年长沙市农村饮用水进行监测,按照《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2006)对结果进行评价。结果 2014—2016年共监测1 838份水样,合格1 021份,总合格率为55.5%,其中2015年的水质合格率最高,差异有统计学意义(P<0.05),不合格项目主要是菌落总数、总大肠菌群和耐热大肠菌群。三年间,丰水期的水质合格率分别为49.43%、61.24%和55.71%,集中式供水的水质合格率分别为59.94%、73.90%和70.32%,地面水的水质合格率分别为67.08%、77.38%和74.24%,地下水的水质合格率分别为36.55%、46.11%和43.14%,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 长沙市农村饮用水水质合格率总体偏低,微生物学指标是影响本市水质合格最主要的指标。与2014年相比,水质质量虽有所改善,仍应进一步加强农村饮用水卫生监管工作,完善制水工艺,规范水质处理与饮用水消毒措施,避免水源性传染病发生的风险。
目的 探讨慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染者前核心区(precore,PC)和基本核心启动子(basal core promoter,BCP)变异特点以及变异株血清乙肝病毒e抗原(hepatitis B e antigen,HBeAg)、乙肝病毒表面抗原(hepatitis B surface antigen,HBsAg)、乙肝病毒脱氧核酸(HBV-DNA)检测的临床意义。方法 采集138例慢性HBV感染者清晨空腹血,以免疫化学发光法检测血清HBeAg、HBsAg,并同时采用磁珠法检测HBV-DNA,应用半巢式聚合酶链反应检测PC/BCP区基因突变。结果 101例未经抗病毒治疗的慢性HBV感染者中,HBeAg阴性组PC、BCP 、PC+BCP 变异率高于HBeAg阳性组,差异有统计学意义(P<0.05)。37例服用核苷类药物一年以上组PC、BCP 、PC+BCP检出率要高于未经抗病毒治疗的HBeAg阳性HBV感染者组(P<0.05)。HBeAg阴性HBV感染患者其PC、BCP和PC+BCP的变异率随着病程的增加而增加(P<0.01)。PC、BCP和PC+BCP变异株组与野生株比较,慢性HBV感染者HBeAg含量减少(P<0.05),DNA复制活跃、HBsAg含量增加(P<0.01)。结论 变异的发生使HBeAg阴性的慢性HBV感染患者越来越多,服用核苷类抗病毒药物和长的疾病病程可能是变异相关因素。对于HBeAg阴转的慢性HBV感染患者观察DNA、HBsAg含量,可了解体内病毒是否确实已被免疫清除。
目的 探讨耐药空洞型肺结核患者手术治疗前后外周血叉状头/翅膀状螺旋转录因子 (forkhead/winged helix transcription factor, Foxp3)表达阳性调节性T细胞(FoxP3+ regulatory T cells ,Treg)水平改变。方法 采用流式细胞术检测13例耐药空洞型肺结核患者手术治疗前后外周血淋巴细胞表面抗原CD4、CD25及胞浆内FoxP3的表达;同时以10例健康者外周血作为健康对照。结果 耐药空洞型肺结核患者手术前外周血CD4+、CD4+CD25-T细胞水平低于健康者(P<0.01);CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25+FoxP3+Treg细胞水平高于健康者(P<0.01)。与手术前比较,耐药空洞型肺结核患者手术治疗后1个月、6个月,CD4+、CD4+CD25-T细胞水平升高,CD4+CD25+T细胞和CD4+CD25+FoxP3+ Treg细胞水平下降(P<0.01);手术治疗后6个月CD4+CD25+FoxP3+ Treg细胞水平较治疗后1个月下降(P<0.01)。结论 耐药空洞型肺结核患者外周血CD4+CD25+FoxP3+ Treg细胞水平升高,有效手术治疗后下降。结核分枝杆菌可能通过诱导机体CD4+CD25+FoxP3+ Treg细胞增殖分化,从而产生免疫逃避。
目的 探索网络MSM人群估计方法,估计深圳市的MSM交友QQ群活跃用户规模,指导深圳市艾滋病防治资源配置和制定MSM人群干预策略。方法 使用捕获-再捕获方法和随机对深圳市10个MSM交友QQ群进行调查,估计QQ交友软件深圳本地活跃MSM人群的数量。结果 两次调查共捕获3 393人,第一次捕获1 519人,第二次捕获1 874人,两次捕获均接受标记人数280人。深圳市活跃QQ群交友软件的MSM约10 141人(95%CI:9 716~10 567)。结论 深圳市MSM交友QQ群的活跃用户已经接近实体场所内活跃的MSM数量,需要重视网络活跃MSM人群的干预工作。
目的 观察和评价国产抗结核药物固定剂量复合制剂治疗老年初治菌阳肺结核的疗效及安全性。方法 收集老年初治菌阳肺结核患者94例,以使用固定剂量复合剂的46例为治疗组,以使用散药异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)、乙胺丁醇(E)的48例为对照组。观察两组近期痰菌阴转、胸部X线病灶改变、不良反应等情况。结果 第2个月末,治疗组和对照组痰涂片阴转率和培养阴转率分别为76.1%和71.7%、75.0%和72.9%,治疗满6个月时,治疗组和对照组痰涂片阴转率和培养阴转率分别为89.1%和91.3%、89.6%和89.6%。胸部X线明显改善(显吸及吸收),治疗组与对照组病灶吸收率分别为89.1%及89.6%。治疗组和对照组分别有4例(8.7%)、5例(10.4%)肝功能异常。结论 固定剂量复合制剂与散药的治疗效果相同,不良反应相近,在老年肺结核患者治疗中值得推广应用。
目的 探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)阳性女性患者宫颈高危型人乳头病毒(HR-HPV)感染情况以及子宫颈细胞学筛查情况。方法 选取2013年1月—2016年9月深圳市第三人民医院爱心门诊就诊的HIV阳性女性患者206例为观察组,另选同期妇科门诊行宫颈癌筛查的HIV阴性患者206例为对照组,对两组患者行宫颈HPV检测及子宫颈液基薄层细胞涂片检查(LCT),观察两组患者宫颈HR-HP感染情况及LCT异常情况,并对观察组患者免疫功能指标予以分析。结果 观察组患者HR-HPV感染率为33.50%,同对照组16.50%对比,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者LCT阳性率为87.86%,同对照组49.51%比较,差异有统计学意义(P<0.05);观察组中,HR-HPV感染患者CD8+细胞数与未感染者比较差异无统计学意义(P>0.05),CD4+细胞数及CD4+/CD8+较未感染患者低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIV阳性女性HR-HPV感染概率较大,LCT阳性检出率更高,宫颈上皮病变及恶性病变发生风险较大;HIV阳性患者感染HR-HPV同CD4+细胞数及CD4+/CD8+有一定关联。
旋毛虫病主要是由旋毛形线虫(Trichinella spiralis)引起的一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病。旋毛虫生活史的各个阶段均能影响宿主的免疫应答。固有免疫系统由组织屏障、免疫细胞和免疫分子组成,是机体对抗病原体感染的第一道防线。在旋毛虫感染过程中,宿主固有免疫系统发挥保护性免疫效应,同时,旋毛虫及其产物亦可干扰固有免疫应答促进虫体的免疫逃避。深入研究旋毛虫感染对肥大细胞、嗜酸性粒细胞、树突状细胞等固有免疫细胞以及组织屏障和相关先天免疫分子的影响机制对旋毛虫病的防控至关重要。